> Блог > Новости отрасли

Почему клеточная культура сначала лизирует эритроциты?

2022-12-23

Основное введение
Лизат эритроцитов — один из самых простых и легких методов удаления эритроцитов, то есть расщепления эритроцитов с помощью лизата, который не повреждает ядросодержащие клетки и позволяет полностью удалить эритроциты. Расщепление лизата — это мягкий метод удаления эритроцитов, который в основном используется для разделения и очистки тканевых клеток, диспергированных ферментативным расщеплением, разделения и очистки лимфоцитов и удаления эритроцитов в экспериментах с тканевыми белками и нуклеиновыми кислотами. кислотная экстракция. Тканевые клетки, полученные путем лизата эритроцитов, не содержат эритроцитов и в дальнейшем могут быть использованы для первичного культивирования, слияния клеток, проточной цитометрии, выделения и выделения нуклеиновой кислоты и белка и т. д.

Инструкции по использованию
Образец клеток ткани
1. Свежие ткани расщепляли поджелудочной железой/ферментом или коллагеназой и диспергировали в суспензию отдельных клеток, а надосадочную жидкость удаляли центрифугированием.

2. Возьмите лизат ELS из холодильника при 4°С, добавьте лизат ELS к клеточному осадку в соотношении 1:3-5 (добавьте 3-5 мл лизата на 1 мл уплотненных клеток), осторожно продуйте и перемешайте.

3. Центрифугировать при 800-1000 об/мин в течение 5-8 минут и удалить верхнюю красную прозрачную жидкость.

4. Осажденную часть собирали и центрифугировали с раствором Хенкса или бессывороточным культуральным раствором 2-3 раза.

5, если взлом не полный/полный, можно повторить шаги 2 и 3.

6. Ресуспендирование клеток для последующих экспериментов; Если РНК экстрагируется, лучше всего это делать в растворе, приготовленном на шаге 4, с использованием воды DEPC.

Эритроциты имеют очень короткий жизненный цикл, всего 120 дней, но они очень быстро воспроизводят кровь, и в этом случае они особенно способны к клеточному делению, и они являются самыми быстро делящимися клетками из всех, поэтому эта клетка очень ценна, так что это очень полезно для клеточной культуры. Это очень просто, в нем нет никаких органелл, только клеточные мембраны и белки.

Предыдущий:Каковы функции набора ELISA?

Следующий:Требования к реагентам и основное представление о концентрации раствора.